Cómo preparar una solución tampón de fosfato
La solución tampón de fosfato (PBS) es una solución tampón comúnmente utilizada en laboratorios biológicos y ampliamente utilizada en cultivos celulares, inmunohistoquímica, biología molecular y otros campos. Este artículo presentará en detalle el método de preparación del tampón fosfato y adjuntará una tabla de datos estructurados para referencia de los lectores.
1. El papel del tampón fosfato
La función principal del tampón fosfato es mantener un valor de pH estable de la solución y garantizar la estabilidad de las condiciones experimentales. Su pH suele ser de 7,2 a 7,4, que es similar al entorno fisiológico y es adecuado para la mayoría de los experimentos biológicos.
2. Método de preparación de la solución tampón de fosfato.
La preparación de tampón fosfato requiere los siguientes reactivos:
| reactivos | Dosis (1L) |
|---|---|
| Cloruro de sodio (NaCl) | 8,0g |
| Fosfato dihidrógeno de potasio (KH2PO4) | 0,24g |
| Hidrógenofosfato disódico (Na2HPO4) | 1,44g |
| Cloruro de potasio (KCl) | 0,2g |
Pasos de preparación:
1. Pesar los reactivos anteriores, agregar 800 ml de agua destilada y agitar hasta que se disuelvan por completo.
2. Utilice ácido clorhídrico o hidróxido de sodio para ajustar el pH a 7,2-7,4.
3. Diluir a 1 L, esterilizar en autoclave o filtrar antes de usar.
3. Precauciones con el tampón fosfato
1. Se deben utilizar reactivos de alta pureza durante la preparación para evitar que las impurezas afecten los resultados experimentales.
2. Al ajustar el pH, opere lentamente para evitar un ajuste excesivo.
3. La solución tampón esterilizada debe sellarse y almacenarse para evitar la contaminación.
4. Preguntas frecuentes sobre el tampón fosfato
| pregunta | Solución |
|---|---|
| El valor del pH es inestable. | Comprobar la pureza del reactivo y prepararlo nuevamente. |
| La solución es turbia | Filtrar o reesterilizar |
| Pobre efecto de amortiguación | Verifique la proporción de reactivos y ajuste la fórmula. |
5. Resumen
La preparación de tampón fosfato es una operación básica en experimentos biológicos. Dominar el método de preparación correcto es crucial para la precisión de los resultados experimentales. Este artículo proporciona recetas y pasos detallados, con la esperanza de ayudar a los lectores.
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